聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)是一種對(duì)特定的靶核酸片段在體外進(jìn)行快速擴(kuò)增的方法，通常由變性—退火—延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成，通過(guò)不同溫度的循環(huán)實(shí)現(xiàn)靶核酸的擴(kuò)增。

實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)是在PCR技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的核酸擴(kuò)增與實(shí)時(shí)檢測(cè)技術(shù)，將熒光染料或熒光探針引入PCR反應(yīng)體系，利用每一溫度循環(huán)熒光信號(hào)的積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期，熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定閾值時(shí)反應(yīng)的循環(huán)數(shù)（Ct值）和被測(cè)模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，因而可用來(lái)進(jìn)行定性及定量分析。

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。因此，無(wú)論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一丁點(diǎn)的DNA，就能用PCR加以放大，進(jìn)行比對(duì)。這也是“微量證據(jù)"的威力之所在。由1983年美國(guó)Mullis首先提出設(shè)想，1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng)，即簡(jiǎn)易DNA擴(kuò)增法，意味著PCR技術(shù)的真正誕生。到如今2013年，PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。1976年，中國(guó)科學(xué)家錢(qián)嘉韻，發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的Taq DNA聚合酶，為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻(xiàn)。

PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。

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