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當前位置:首頁技術文章單克隆抗體的純化——艾柏森生物

單克隆抗體的純化——艾柏森生物

更新時間:2024-02-22點擊次數:861

單克隆抗體的純化是一個關鍵步驟,確保抗體的高純度和活性。以下是一般性的單克隆抗體純化流程:

 

細胞培養: 單克隆抗體通常是從哺乳動物細胞或其他表達系統中生產的。首先,需要進行細胞培養,以產生抗體。

 

 

收集培養上清液: 抗體通常以分泌的形式存在于培養上清液中。上清液是通過離心來去除細胞碎片和細胞殘渣,然后收集清液以進行后續處理。

 

 

蛋白A親和層析: 蛋白A是一種常用的親和層析介質,用于純化大多數IgG類型的抗體。抗體可以與蛋白A結合,而其他污染物則不會結合,因此可以通過洗脫步驟來純化抗體。

 

 

離子交換層析: 如果需要進一步提高純度,可以使用離子交換層析來去除殘留的污染物和其他蛋白質。通過調節鹽濃度和pH值,可以選擇性地洗脫抗體。

 

 

尺寸排除層析: 這是一個常用的步驟,用于進一步去除任何殘留的雜質,如聚集物或碎片。尺寸排除層析根據分子大小將溶液分離,較大的分子會被排除,而較小的單克隆抗體則通過。

 

 

濃縮和 buffer exchange 在純化的最后階段,抗體可以被濃縮,并且可以進行緩沖液的交換,以適應后續的實驗或應用。

 

 

純化后的分析: 純化后的抗體需要進行質量分析,包括濃度測定、純度分析、功能測試等,以確保其適用于預期的應用。

 

以上步驟是單克隆抗體純化的一般流程,具體操作可能會因實驗目的、抗體類型和純化系統的不同而有所變化。


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